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miRNA,siRNA,dsRNA與shRNA的區別

釋出時間↟✘: 2020-05-25   

siRNA╃◕·▩╃,shRNA╃◕·▩╃,dsRNA╃◕·▩╃,miRNA間的區別
RNA干擾(RNAi)╃◕·▩╃,即用20多個核苷酸組成的短的雙鏈RNA(siRNA)代替傳統反義核酸進行轉錄後基因沉默╃◕·▩╃,已經迅速而廣泛地應用到基因功能╃◕·▩╃,基因表達調控機制研究等熱門領域╃◕·▩╃,併為基因治療開闢了新的途徑╃│₪│。近兩年來╃◕·▩╃,這方面的科學論文及報道爆炸性增長╃◕·▩╃,幾乎每天都有新的結果湧現╃│₪│。這些論文中╃◕·▩╃,出現了很多與RNA干擾相關的概念╃◕·▩╃,意思很相近但並不完全相同╃◕·▩╃,這裡列舉了幾個常見的RNA干擾相關的名詞及其簡單的解釋↟✘:
1│··✘•、  miRNA↟✘:在遺傳學中╃◕·▩╃,微RNA(microRNAs╃◕·▩╃,miRNA)是長度在21-23個核苷酸之間的單鏈RNA片段╃◕·▩╃,調節基因的表達╃│₪│。miRNA由基因編碼╃◕·▩╃,從DNA轉錄而來╃◕·▩╃,但不翻譯成蛋白╃│₪│。初級轉錄產物(primary transcripts╃◕·▩╃,pri-miRNA)縮短其頸環結構得到功能性的miRNA╃│₪│。成熟的miRNA分子與一個或更多個mRNA分子部分互補╃◕·▩╃,其主要功能是下調基因的表達╃│₪│。而microRNA這個概念第一次在2001年Science (26 October 2001)的文章中出現╃│₪│。
2│··✘•、  dsRNA↟✘:雙鏈RNA(double-stranded RNA, dsRNA)是一種有互補鏈的RNA╃◕·▩╃,與細胞中發現的DNA相似╃◕·▩╃,dsRNA構成了一些病毒(雙鏈RNA病毒)的基因組╃│₪│。像病毒RNA或siRNA之類的雙鏈RNA能夠促發真核細胞中的RNA干擾╃◕·▩╃,引起脊椎動物中的干擾素反應╃│₪│。
3│··✘•、  shRNA↟✘:小發卡或短髮卡RNA(a small hairpin RNA or short hairpin RNA, shRNA)是一段具有緊密髮卡環(tight hairpin turn)的RNA序列╃◕·▩╃,常被用於RNA干擾沉默靶基因的表達╃│₪│。利用載體把shRNA匯入細胞╃◕·▩╃,載體中的U6 啟動子確保shRNA總是表達;這種裝載了shRNA載體可被傳遞到子代細胞中去╃◕·▩╃,從而使基因的沉默可被遺傳╃│₪│。shRNA的髮卡結構可被細胞機制切割成siRNA╃◕·▩╃,然後siRNA結合到RNA誘導沉默複合物上(RNA-induced silencing complex╃◕·▩╃,RISC)╃◕·▩╃,該複合物能夠結合到目的mRNAs並將其降解╃│₪│。shRNA 是由RNA 聚合酶Ⅲ轉錄的╃◕·▩╃,哺乳細胞中的shRNA產物有時會促使細胞產生干擾素反應(細胞遇到病毒侵襲時做出的自我防衛反應)╃◕·▩╃,而miRNA中卻不會遇到這種問題(miRNA是由RNA聚合酶Ⅱ轉錄╃◕·▩╃,與轉錄mRNA的聚合酶相同)╃│₪│。shRNA也被用於植物和其它系統中╃◕·▩╃,在這些系統中不需要U6啟動子的驅動╃│₪│。在植物中╃◕·▩╃,常用的增強表達的啟動子是CaMV35S(cauliflower mosaic virus 35S),在這種情況下╃◕·▩╃,RNA聚合酶Ⅱ參與了轉錄╃◕·▩╃,起始RNA干擾╃│₪│。
4│··✘•、  siRNA↟✘:小或短干擾RNA(small/short interfering RNA, siRNA)是一類20-25個核苷酸長度的雙鏈RNA分子╃◕·▩╃,其主要在RNAi通路中起作用╃◕·▩╃,干擾特異基因的表達╃│₪│。此外siRNA在RNAi相關的通路中也起作用╃◕·▩╃,如抗病毒機制╃◕·▩╃,基因組染色體結構的塑造等╃│₪│。其結構是一段完全互補的RNA雙鏈╃◕·▩╃,兩端各有兩個未互補的的鹼基╃│₪│。

最後做一下小結╃◕·▩╃,miRNA╃◕·▩╃,siRNA╃◕·▩╃,dsRNA和shRNA都是RNA干擾技術中用到的小分子RNA╃◕·▩╃,其不同之處在miRNA 是單鏈RNA╃◕·▩╃,其餘均為雙鏈RNA;siRNA和dsRNA相似;shRNA需透過載體匯入細胞後╃◕·▩╃,然後利用細胞內的酶切機制得到siRNA而最終發揮RNA干擾作用╃│₪│。


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